培养基的配制

培养基的配制

原创  作者：王秀云

培养基的配制 (一）

 
一  培养基的成分
培养基是为食用菌的生长提供营养的基质。食用菌同其它生物一样，从菌丝体的生长到子实体的形成，都需要维持生命活动的水，同时，不断从基质中摄取构成细胞有机质的碳、氮、磷、硫和钙、镁、钾、铁、锰、锌等多种大量和微量矿物元素，以及维生素等养分。
1、碳源  是食用菌的碳素营养来源，它不仅能提供碳素以合成碳水化合物和氨基酸的基架，同时又是重要的能量来源。食用菌大都以有机碳化物作为碳素营养。大分子的碳水化合物必须经过相应的酶类分解成小分子物质才能被食用菌吸收利用。
2、氮源  为食用菌提供合成蛋白质和核酸的必要元素氮素。食用菌的氮源主要有蛋白质、氨基酸、尿素、铵盐等。有机氮优于无机氮。
食用菌不仅需要一定量的碳、氮物质，还要求碳氮物质之间有合适的比例，如白蘑菇在营养生长阶段(菌丝生长)，碳氮比 (C / N) 以 20∶1 左右为宜。
3、无机盐  适量的无机盐，可以供给食用菌其它必要的元素。由于这些元素需要量少，而且在一般的培养料中都会含有，因此，一般情况下不需要另外添加。但是钙的加入有特殊作用，一般钙的需要量也比其它元素需要量大，而且，钙可以调节培养料的酸碱度，还可以促进菌丝体生长，增加菌体干重，尤其可以增加子实体的重量，因此，在生产中，培养材料多加入适量的钙 (钙⁺⁺)。
4、生长素  如在上述条件都满足的情况下，食用菌仍生长不好或不生长，这时就要考虑适当加入一定量的生长素，包括维生素和核酸等。如，培养基中缺乏维生素B₁，食用菌的生长就迟缓，这时，就需要适当添加。但是，加这些物质，量一定不要多。

 5、水  一般含水量应在 55%~57% 为宜。

二  常用培养基和培养料的配制

1、土豆蔗糖琼脂培养基 (PSA)
   土豆汁     1000毫升
             (将去皮的土豆切成小块，称取200克，放在1000毫升水中煮沸半小时后， 补足水分，过滤制成。）
   蔗糖        20克  （蔗糖也可以改用葡萄糖，即为PDA培养基）
   琼脂      18--20克
   在 121℃  高压下灭菌30-40分钟。
这个培养基是制作食用菌母种用的。其中，土豆也可用100克黄豆芽代替。
在这个培养基中，糖类提供的是碳源，土豆汁提供氮源及其它营养元素。琼脂是一种食用菌不能利用的藻类物质，因此并不提供任何营养，只是起支撑固定作用，即保持培养基的固体状态。琼脂的特点是在温度达 98℃ 以上时呈液体状态，温度降至45℃以下时即成固体状态。因此，在配这个培养基时，加入琼脂后要加热煮沸，使琼脂熔化，再降至低温使其凝固，培养基才方便保存和使用。

2、锯末-米糠培养基 

3、稻草-麦麸（米糠）培养基
       

4、棉籽皮培养基 

上述培养基在  126℃ 高压下灭菌 60 分钟，或常压蒸8－10小时，再焖一夜。

这几种培养基可用于食用菌的原种、栽培种或出菇用。

加水量的控制除了用器具测量外，还可以用一个经验方法，即用手握一把培养基，使劲攥，手指间有水渗出，或有水滴出现但不下滴， 松开手后培养基成团，轻轻触碰，培养基即在手中散开，或让培养基从手中自然落地，培养基即散开，即为比较合适的水量。
 附：几种常用食用菌培养料营养成分表

培养基的配制(二）
 
一、配制培养基的几个要点
 
配制培养基应考虑以下几个方面:
(一）场地与时间的选择
以水泥地和木板坪为好。选场后要清理四周环境，把场地洗净。配制时间应避开中午和雨天，因中午气温高培养料易酸败，雨天湿度太大易污染杂菌。
(二) 配制方法
分为过筛、混合、搅拌三步进行。
1、过筛 把原料和辅料用2~3目的竹筛或铁筛进行过筛，剔除小木片、小枝条及其它有块有棱角的硬物，以防装料时刺破塑料袋。
2、混合 把干料倒在拌料场上拌均匀，然后把可溶性的添加物溶于水中，再加入干料中进行拌和。
3、搅拌 可采用拌料机或人工拌料。先把干料堆成山形，从尖端挖向四周，使其形成一个坑，再把清水倒入坑里，使水分逐渐渗透入料里，当水分被干物质吸收后，再把料重新整成山形料堆，再次如上操作；如此重复若干次，直至把料拌匀。(三) 配制过程中的4个关键:
(三)  掌握四个关键

1、 灵活调节水量  一般掌握“四多四少”

木材质地硬与松，木屑颗粒粗与细，本身基质干与湿之差，一般约相差10%。特别是甘蔗渣、棉籽壳、玉米芯等原料，吸水性极强，所以调水量应相应增加。

2、拌料力求均匀 要求做到原料与辅料混合均匀，干湿搅拌均匀，pH值均匀。
3、操作速度要快 避免因时间过长而使培养料发生酸败。一般当干物质加入水分，搅拌至装袋开始，其时间不超过2小时为妥，当天拌料，及时装袋灭菌，可避免培养料酸败。
4、减少杂菌污染 原料要求足干，无霉变，配制前置于烈日下曝晒1~2天；拌料选择晴天上午气温低时开始，争取上午10点前拌料结束，转入装料灭菌；在气温较高的季节配料时，可添加0.1%的多菌灵拌入料中,有利杀灭杂菌。多菌灵这农药，使用时要严格按照定量的比例配用，不可随意增加。 
 
 
二、怎样测定培养基含水率与pH值？
 
(一）培养基含水率 搅拌后的培养基要进行水分测定，含水量应在55%~57%为宜。含水量偏低，菌丝生长缓慢、纤弱；含水量偏高，料温随之上升易酸败，导致杂菌污染；且料中空气不足，影响菌丝生长；如含水量超过65%，则菌丝生长受阻。
培养料含水量计算公式：
             

         水量                 =   含水率 ( % )

 培养料总量（干物质+水量）

例 : 杂木屑培养基配方，料与水之比为 1 : 1.25, 即干物质100千克+水125千克=培养料总量225千克，水量125千克 ÷ 培养料总量225千克 = 含水率55.6%。
在实际操作中，常用感官测定，方法见上节。
如果水分不足，可加水调节；如果水分偏高，不宜加干料，以免配方比例失调，只要把料摊开，让水分蒸发至适度即可。
（二）培养料的酸碱度，即pH值，直接影响菌丝的生长，因此，在配制培养料时要注意调节。一般真菌适于中性偏酸的环境，细菌和放线菌适于中性偏碱的环境。食用菌大多适于偏酸的环境，但是也有的食用菌适应范围较广，偏酸偏碱都能生长得很好，因此，在配制培养基时可根据不同菌的要求和适应性调节培养料的pH。若培养料过碱，可加些弱酸调节，若过酸，可加些石灰水调节。还应注意，菌在生长过程中会产生一些酸性物质，培养料的pH值会随菌的生长而降低，所以，最初时培养料的pH值调得稍高一点儿较为妥当。
  测定培养料的pH值，可取广谱试纸一小段，插入培养料中3秒钟后，取出对照标准版比色，从而查出相应的pH值。
  
三、培养料装袋的要求
 
配好的培养料要尽快装袋。无论是机装还是手工装袋，都要达到以下五个要求：
1、松紧适中 标准的松紧度，应以成年人手抓料袋，五指中等力捏住，袋面呈微凹指印，有木棒状感觉为妥。如果手抓料袋而两头略垂，料断裂成痕，表明太松。
2、不超时限 培养料装入袋内，由于不透气，内部细菌繁琐产热，料温上升很快，导致培养料发酵；为了防止这种情况，装袋要抢时间，从开始，到结束，时间不超过3小时。
3、扎牢袋口 要求捆扎牢固不漏气，防止灭菌后基料受热后膨胀，热气冲散扎头，易致杂菌从口侵入。
4、轻取轻放 装料和搬运过程中不可硬拉乱摔，以免袋破裂。同是装料场地和用具，需铺放麻袋或薄膜，防止被砂粒或尖物刺破袋。以免杂菌有孔可入。
5、日料日清 培养料配制和装量要一灭菌设备的容量相衔接，做到当日配料，当日装完，当日灭菌。培养料经过装袋后即成为营养袋，简称料袋。