菌种制作----组织分离法制母种

菌种制作----组织分离法制母种
原创  作者:王秀云   

组织分离(无性繁殖)   且记: 一定要无菌操作! 

将子实体、菌核、菌索等一小块组织放于斜面培养基上,使其萌发为纯菌丝的方法,称为组织分离。该法具有简便、易成功、能保持原菌种性状等优点,但复制多代易退化,应与孢子分离交替进行。组织分离法适用于绝大多数食用菌。     

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(1)选种菇选外观典型、大小适中、菌肉肥厚、无病虫害、八成熟、第12茬的子实体。    
2)种菇消毒可用酒精棉球迅速擦拭。
注意: 绝不可为了消毒彻底就将菇体直接泡在酒精里,那样会把菇细胞深度杀死,不能分离出活细胞。  
3)将消毒后的菇体组织用灭菌刀纵剖(或直接用消毒过的手撕开),用尖头镊在柄盖交界处取绿豆粒大的组织块,放入斜面培养基上。    
注意种菇含水量及组织块勿过大。 

   
胶质的耳类食用菌进行组织分离时,一般不用酒精消毒菇体,或者仅用沾酒精不多的棉球擦拭菇体表面,以防把菇内部细胞杀死,而是用无菌水反复多次冲洗,至少换水六次以上,尽量减少菇体表面的杂菌数量,然后取一小片组织块,放入斜面培养基上--有条件的最好把组织块放在平板上(倒有固体母种培养基的培养皿,培养基凝固后即为平板),培养几天后,从培养皿上的纯培养菌丝块处取菌接入斜面。


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